凝膠濾膜作為尺寸排阻色譜（SEC）或脫鹽純化中的核心分離介質(zhì)，其性能直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性與重復(fù)性。隨著使用次數(shù)增加，膜表面及孔道內(nèi)易吸附蛋白質(zhì)、脂類或顆粒雜質(zhì)，導(dǎo)致通量下降、分離效率降低。因此，掌握正確的清洗方法，不僅是延長
凝膠濾膜壽命的關(guān)鍵，更是保障實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可靠性的必要措施。
一、清洗原則：溫和有效，防止損傷
凝膠濾膜多由交聯(lián)葡聚糖、瓊脂糖等親水性高分子材料制成，結(jié)構(gòu)脆弱，不耐高壓、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿或有機(jī)溶劑。清洗應(yīng)遵循“低壓力、適pH、防脫水”的原則，避免破壞其三維多孔網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。
二、常規(guī)清洗步驟
沖洗殘留物
實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，立即用至少5-10倍柱體積的去離子水或初始緩沖液沖洗系統(tǒng)，去除未結(jié)合的樣品和鹽分，防止沉淀堵塞孔道。
去除弱吸附物
使用0.1–0.5mol/LNaCl溶液沖洗，可有效清除因離子相互作用產(chǎn)生的非特異性吸附雜質(zhì)，適用于大多數(shù)情況。
深度清洗（去蛋白）
對于蛋白質(zhì)殘留嚴(yán)重的情況，推薦使用含0.5–1mol/LNaOH的溶液進(jìn)行清洗。堿性條件可水解并去除大多數(shù)有機(jī)污染物。注意：瓊脂糖基濾膜可耐受0.5–1MNaOH（清洗時(shí)間≤30分鐘），而葡聚糖基材料則不耐強(qiáng)堿，應(yīng)避免使用。
去除脂類或疏水性雜質(zhì)
可采用30%–70%的乙醇或異丙醇短時(shí)沖洗（≤1小時(shí)），但需注意有機(jī)溶劑可能導(dǎo)致部分凝膠收縮，沖洗后應(yīng)充分用水平衡。
三、特殊清洗方案
變性劑清洗：對于頑固蛋白聚集體，可用6M尿素或4M鹽酸胍溶液沖洗，隨后逐步降低濃度平衡。
去垢劑輔助：添加0.1%–0.5%非離子型去垢劑（如TritonX-100或Tween-20）可增強(qiáng)脂蛋白去除效果，但需沖洗避免殘留干擾后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
四、保存與防干涸
清洗完成后，應(yīng)將濾膜保存在20%乙醇或0.02%的緩沖液中，防止微生物滋生。切忌干燥保存，干涸會導(dǎo)致孔結(jié)構(gòu)塌陷。
五、驗(yàn)證清洗效果
定期檢測純水通量（PWP）和標(biāo)準(zhǔn)蛋白的分離效率，判斷膜性能是否恢復(fù)。
更新時(shí)間：2025-08-25 
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